孕早期白带增多、肚子胀通常是正常的孕期反应，怀孕之后，大部分人都会有小腹隐约的疼痛，像痛经一样，伴下腹轻度坠胀、腰酸，但程度不会太重，对日常生活没有明显的影响，这是由于子宫在增长，子宫周围的血供在增加，胎囊撑着子宫引起弱宫缩，只要不是宫外孕，这个不用担心，正常现象，严重的明显的疼痛，需要去看医生。
怀孕以后孕酮升高，孕酮减少宫缩和出血，也有减少肠蠕动、导致腹胀、便秘的作用，如果平时活动量太少，下午或晚上容易肠胀气出现腹痛，适当增加活动或少吃多餐可以缓解。
怀孕之后，偶尔会有突发的阴道疼痛，这也是正常现象，跟肌肉不规则的收缩、盆腔血供增加、子宫晃动、扭转之后的牵扯有关系。
ELISA样本制备指南及注意事项
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定义及介绍
ELISA（enzyme linked immunosorbent assay，酶联免疫吸附测定）是最基础的免疫学实验之一，其理论基础是抗原抗体的特异性反应。ELISA因其特异性强、灵敏度高、稳定性好而被广泛使用。ELISA试剂盒检测样品包括血清、血浆、细胞培养上清、灌洗液或尿液等生物样本，实验操作步骤并不繁琐，但实验完成后需要把样本检测结果OD值转化为浓度值，从而供下一步分析所用，因此样品的预处理对于后续数据处理和结果分析非常重要。
样本制备指南
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血清
全血样品于室温放置2小时或2-8℃过夜后于2-8℃，1000×g离心20min，取上清即可检测。收集血液的试管应为一次性的无内毒素试管。避免使用溶血，高血脂样品
2.血浆
抗凝剂推荐使用EDTA-Na
2，样品采集后30min内于2-8℃，1000×g离心15min，取上清即可检测。
3组织匀浆/组织全蛋白
用预冷的PBS (0.01M, pH=7.4)冲洗组织，去除残留血液，称重后将组织剪碎。将剪碎的组织与对应体积的PBS(一般按1:9的重量体积比，比如1g的组织样品对应9mL的PBS，具体体积可根据实验需要适当调整，并做好记录。推荐在PBS中加入蛋白酶抑制剂)加入玻璃匀浆器中，在冰上充分研磨。为了进一步裂解组织细胞，可以对匀浆液进行反复冻融或超声破碎。最后将匀浆液于2-8℃，5000×g离心5-10min，取上清检测。
其余方法：在分析天平（AL204型）上，称量50-100mg组织样本。在样本中加入5倍质量体积的含1%PMSF的1×PBS缓冲液；并用小剪刀等工具将组织样本剪碎（尽可能小块）。注：1×PBS缓冲液使用前，需加入PMSF，现用现加，PMSF终浓度为1mM。打开超声破碎仪，将超声破碎仪的功率调至25%，超声时间2s，间隔时间5s，总时间2min。放入样本，冰上超声3min。视样本匀浆情况调整总时长。超声完成后，将样本放于4℃或冰上裂解30min。打开离心机，将转速调至12000×g；将样本放入离心机，离心10min，取上清，按需要分装，于-20℃贮存。注：留取20μL样本，用于后续BCA法测定样本蛋白含量。
组织匀浆液或组织全蛋白中的蛋白浓度对于检测实验的影响至关重要，建议样本蛋白浓度至少1mg/mL以上，较低浓度蛋白的组织匀浆液有可能导致ELISA检测失败。
4.细胞提取液
贴壁细胞
用冷的PBS轻轻清洗，然后用胰蛋白酶消化，1000×g离心5min后收集细胞；
悬浮细胞可直接离心收集。收集的细胞用冷的PBS洗涤3次。每10
6个细胞中加入150-200μLPBS重悬(推荐在PBS中加入蛋白酶抑制剂；若含量很低可减少PBS的体积)并通过反复冻融或超声使细胞破碎。将提取液于2-8℃，1500×g离心10min，取上清检测。注：留取20μL样本，用于后续BCA测定。
其余方法：
对于
贴壁细胞：去除培养液，用PBS、生理盐水或无血清培养液洗一遍。以2百万细胞为例，在样本中加入100μL的含1%PMSF的1×PBS缓冲液，震荡混匀细胞，4℃或冰上裂解30min。用枪吹打数下，使裂解液和细胞充分接触。必要时可以进行超声处理，超声步骤与组织样本相同。
对于
悬浮细胞：离心收集细胞，以2×10
6细胞为例，在样本中加入100μL的含1%PMSF的1×PBS缓冲液，震荡混匀细胞，4℃或冰上裂解30min。用手指轻弹悬浮细胞以充分裂解。充分裂解后应没有明显的细胞沉淀。如果细胞量较多，必需分装成（5-10）×10
5细胞/管，然后再裂解。必要时可以进行超声处理，超声步骤与组织样本相同。注：1×PBS缓冲液使用前，需加入PMSF，现用现加，PMSF终浓度为1mM。打开离心机，将转速调至12000×g；将样本放入离心机，离心10min，取上清，按需要分装，于-20℃贮存。注：留取20μL样本，用于后续BCA法测定样本蛋白含量。
5.细胞培养上清或其他生物体液
收集液体后于2-8℃，1000×g离心20min，除去杂质及细胞碎片。取上清检测。注：因细胞培养基中的胎牛血清影响或其他生物体液中杂蛋白的影响，不建议进行BCA法测定样本蛋白含量。
实验细节与注意事项
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收集血液应避免产生溶血现象。红细胞破碎，释放大量的过氧化物酶，会影响ELISA检测中的辣根过氧化物酶（HRP）或碱性磷酸酶（AP）的酶促反应，造成检测结果的不确定性。
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样品收集后若在1周内进行检测可保存于2-8℃，若不能及时检测，请按一次使用量分装，冻存于-20℃(1个月内检测)，或-80℃(3个月内检测)，避免反复冻融。在检测前，冷冻过的样本应缓慢地融化并离心除去冻融过程产生的沉淀物。室温混匀后使用。
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试剂盒检测范围不等同于样本中待测物的浓度范围，建议实验前通过相关文献预估样本中待测物的浓度并通过预实验确定样本的实际浓度情况。如果样品中待测物浓度过高或过低，请对样本做适当的稀释或浓缩。
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检测样本的稀释推荐多步稀释法，常规稀释检测为血清/血浆检测稀释度为2倍、20倍、200倍；细胞上清稀释度为5倍、50倍、500倍；建议实验前通过相关文献预估样本中待测物的浓度。
对于稀释倍数比较大的检测样本，参考稀释方案如下：
稀释100倍：一步稀释。取5μL样本到495μL标准品/样本稀释液内，做100倍稀释；
稀释1000倍：两步稀释。取5μL样本到95μL标准品/样本稀释液内，做20倍稀释，再取5μL 20倍稀释样本到245μL标准品/样本稀释液内，做50倍稀释，总共稀释1000倍；
稀释100000倍：三步稀释。取5μL样本到195μL标准品/样本稀释液内，做40倍稀释，再取5μL 40倍稀释样本到245μL标准品/样本稀释液内，做50倍稀释，最后取5μL 2000倍稀释样本到245μL标准品/样本稀释液内，做50倍稀释，总共稀释100000倍；
每步稀释时取液量不少于3μL，稀释倍数不超过100倍。每步稀释都需混合均匀，避免起泡。
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若所检样本不在说明书所列样本之中，建议做预实验验证其检测有效性。
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若使用化学裂解液制备组织匀浆或细胞提取液，由于引入某些化学物质会导致ELISA测值出现偏差。
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某些重组蛋白可能与试剂盒中捕获或检测抗体不匹配而出现不能检测的情况。
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对于组织匀浆、组织全蛋白、细胞提取液等蛋白提取样本，经BCA法测定样本蛋白含量后，建议进行蛋白浓度的统一化，避免因组织重量、细胞数、产物体积等因素造成的人为误差；例如，统一全部检测样本浓度为1-2mg/mL，进行后续的稀释和检测。
对于正在备孕的女性来说，若是想要判断自己是否怀孕，那么最为关键的就是需要找出自己的排卵期和排卵日，其实用不着这么麻烦，因为卵子排出来的时候，我们其实是有感觉的，今天小编就来说说，卵子排出的“一刹那” ，女人“有感觉”的，但是许多人却并没有放在心上，今天，我们就来具体聊聊这个话题！
“卵子”排出的一刹那，身体会有什么表现？细心就可以发现
1、肛门会有明显的坠胀感
我们身体里面已经发育成熟的卵子是从卵巢表面排出来的，从卵巢排出时必须要通过滤泡，可能会让绿泡里面少量的液体慢慢的流向盆腔部位，这样一来的话，患者往往会出现坠胀感，而且还可能会表现在下腹出现疼痛的现象。因为排卵子时所引起的疼痛非常轻微，所以往往被人们所忽略。
2、体温会变高
女性在排卵前后，身体里面的雌激素也会出现很大的变化，对于一些体质敏感的女性来说，也许会出现子宫出血的可能性，不仅如此，这部分女性可能她们的体温会上升0.5摄氏度左右，如果女性想要知道自己的排卵期，可以每天坚持测量早晨静态时基础体温，然后根据体温的变化来判断排卵期。
3、阴道分泌物会明显增多
白带有利于帮助人体更好的抑制病原菌的生长，保护了阴道，防止阴道干涩。女性排卵之后白带会明显的增多，呈现乳白色，就好像是蛋清一般，而且有明显的拉丝。女性排卵之后宫颈的雌性激素和孕激素会发生很大改变，于是宫颈口处于开张状态，从而分泌大量的粘液。
4、子宫会出现出血
卵子排出时阴道有轻微流血属于正常现象，大家不要过于惊慌，原因在于，卵泡成熟后需要破裂排卵，让雌性激素快速的下降，因为雌性激素不能让子宫内膜正常的生长，从而让其表皮脱落，白带里面会带有明显的血丝，这样的情况可能两三天就会好转，大家不要过于担心。
那么，女性在备孕期该怎么办呢？
1、备孕前要进行全面详细的身体检查
许多男女因为自身方面的原因，导致一直怀不上孩子。因此，就需要人们在进行备孕之前，要进行详细的全面的身体检查，如果检查出来不利于怀孕的疾病，要完全治愈之后再进行备孕。
2、正确推算排卵期
女性在排卵的时候，可以适当的进行夫妻生活，或许更有利于提高受孕的几率。所以说，能够正确推算女性的排卵期，对于备孕来说是非常重要的，对于那些月经非常规律的女性，排卵期也会比较固定，是很好推算的。但是对于那些月经不规律的女性，就要买一些排卵的试纸，来准确的推测排卵期。
3、不抽烟喝酒
不管男女，若是在备孕的时候，都是最好不要吸烟喝酒的。原因在于，烟草中尼古丁等有害物质，会使男性的精子质量和数量严重的下降，甚至还会使男性的精子畸形率上升，即使怀孕了也是不健康的。酒精也是一样，不只是不利于自己的健康，而且还可能会造成小孩出现问题。
以上就是女性备孕的小知识，希望可以给生活中的你们带来帮助。好了，今天的分享就到这里结束了，关于备孕这个话题，网友们有什么疑问的吗？欢迎在评论区留言，谢谢！
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